Информационный сайт для врачей и студентов-медиков

Библиотека - Иммунологические методы (Под редакцией Г. Фримеля)

Проба на восстановление тетразолиевого нитросинего (ТНС) [5, 10]. ТНС восстанавливается нормальными ПМЯЛ до форма-зана. Смешивают с 0,1 мл крови 0,1 мл 0,1% раствора ТНС в 0.15М NaCl, инкубируют 20 мин при 37 °С, еще раз тщательно перемешивают. Включения формазана в клетки определяют микроскопией. Результат выражают в процентах формазан-по-зитивных клеток.

Несколько сложнее следующий метод: 1 каплю крови пациента наносят на покровное стекло. Инкубируют 20 мин при 37°С во влажной камере, затем осторожно отмывают стекло стерильным 0,15 М NaCl. Кладут покровное стекло на предметное, куда была нанесена 1 капля ТНС-среды (0,5 мл сыво-ротки + 0,3 мл стерильного 0,15 М NaCl + 0,6 мл ТНС, см. ранее). Инкубируют 30 мин во влажной камере при 37 °С, удаляют покровное стекло и высушивают на воздухе. В течение 60сек фиксируют абсолютным метанолом и отмывают дистиллированной водой. Окрашивают в течение 5 мин сафранином (1 г сафранина + 100 мл дистиллированной воды + 40 мл глицерина), отмывают. Формазан-позитивные клетки отличаются большими размерами, они напоминают бластные клетки и содержат голубые гранулы. Обычно в препарате определяется около 30% формазан-позитивных клеток.

Вышеприведенные методы оценки фагоцитоза представляют собой обобщение очень большого числа публикаций. Более детальную информацию по этим вопросам можно найти в соответствующих работах [1, 2, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14].

3.21.3. ОБЩАЯ ОЦЕНКА МЕТОДОВ

Оценка способности клеток к фагоцитозу представляет собой незаменимый метод исследований в современных клинико-им-мунологических лабораториях. Этот метод используется в диагностике таких заболеваний, как хронический гранулемятпз, дефицит миелопероксидазы, синдром Чедиака — Хигаси, дефицит глюкозо-6-фосфат дегидрогеяазы, синдром Иова, синдром Дауна, синдром Лейнера и др. Определение фагоцитирующей способности все шире используется в научных исследованиях по иммуномодуляции, повышению резистентности, регуляции иммунного ответа и др.

Несмотря на самые оптимистические оценки, очевидна большая сложность и трудоемкость методов исследования фагоцитоза. Особые сложности представляет работа с живыми микроорганизмами. Интерпретация результатов существенно затрудняется, когда приходится иметь дело более чем с двумя переменными (живые микроорганизмы, опсонизация и др.). Очень сложно или даже невозможно переносить данные литературы на результаты собственных исследований.

В литературе нет исчерпывающих данных о сравнении эффективности различных методов оценки фагоцитоза. Каждый

Методы иммуноанализа

Scroll To Top
[ Reset Settings ]
Rambler's Top100
Картаsns krf e0 nd5 ah81 rod solnce rod solnc cent1 cen40
rss
Карта