Страница №111

§ 5.4. Моноклональные антитела к мышиному Fas-антигену 111

(Jo2), продуцирующая МКА IgG-класса. Эти МКА специфически распознавали Fas-антиген и иммунопреципитировали излизата W4-KJieTOK полосу в 45 кДа, а также оказывали цитолитическое действие на клеточные линии, экспрессирующие мышиный Fas-антиген (клетки W4 в дозовой зависимости). Авторы сообщали, что окрашивание мышиных тимоцитов этими МКА показало, что тимоциты мышей дикого типа и Ipr eg экспрессируют Fas-антиген, вто время как лишь незначительная экспрессия Fas-антигена была выявлена у lpr-мышей. Когда эти МКА вводили интраперитонеаль-но мышам, то через6 ч погибали мыши, получившие 100 мкг МКА, а через 8ч — половина мышей, получивших 10 мкг МКА. Когда МКА вводили мышам MRL+/+, MRL-lpr/lpr и MRL-lpr cg/lpr eg, то мыши MRL-lpr/lpr и MRL-lpr cg/lpr eg были резистентны к введенным МКА, в то время как MRL+/+ погибали так же быстро, как и BALB/c. Эти результаты показывают, что летальный эффект anti-Fas МКА зависит от связывания МКА и функционирующего Fas-антигена в тканях. Тот факт, что Ipr cg-мыши, экспрессирующие нефункционируюший Fas-антиген, были резистентны к летальной дозе МКА, доказывает лишь незначительное вовлечение системы комплемента в этот процесс. Биохимический анализ сыворотки показал специфическое, значительное и быстрое увеличение уровня глютамат оксалоацетат трансаминазы (GOT) и глютамат пируват трансаминазы (GPT) после инъекции МКА, что говорило о повреждении печени. Гистологический анализ показал фокальное кровотечение и некроз в печени через 2 ч после инъекции МКА, в то время как электронная микроскопия гепа-тоцитов указывала на морфологические характеристики апоптоза. Эти результаты доказывали, что гепатоциты погибали вследствие апоптоза, хотя этот процесс происходил так быстро и широко, что гранулоциты и макрофаги не могли фагоцитировать апоптотичес-кие клетки, и в тканях развивался вторичный некроз.

В 1995 г. Nishimura Y., lshii A., Kobayashi Y. et.al. сообщили о получении хомячковых и крысиных МКА, направленных к мышиному Fas-антигену. Armenian-хомячки и Lewis-крысы были иммунизированы очищенным рекомбинантным растворимым химерным протеином mFas-AlC2A, и гибридомы были получены