Сб, Май 14, 2011
Text Size

Иммунология - Иммунологические проблемы апоптоза - Барышников А.Ю.

в следующем: С056-положительные NK-клетки выделяли из обогащенной NK-популяции PBL (обогащенную NK-популяцию получали из неприлипающих PBL с помощью негативной селекции, используя иммуномагнитные шарики) с помощью проточной ци-тометрии и культивировали с 20% кондиционированной лейкоцитарной средой (LCM) и 1мМ иономицина. После культивирования в течение 14-28 дней активированные NK-клетки собирали, ре-суспендировали в стерильном PBS и вводили внутрибрюшинно 5-недельным самкам BALB/c-мышей. Спленоциты иммунизированной мыши сливали с миеломными клетками NS-l/l-Ag4-l, используя полиэтиленгликоль. Супернатанты нескольких гибридом сильно реагировали с LCM и иономицин-активированными NK-клетками и очень слабо реагировали или совсем не реагировали с покоящимися NK-клетками. Было определено, что супернатант одной такой гибридомы 7С11-0991-2 сильно ингибирует пролиферацию активированных NK-клеток. Эта гибридомабыла субклони-рована дважды путем лимитирующих разведений, и был определен IgM-изотип. С помощью иммуноблота на выделенных мембранах клеток LAZ 388 В-лимфобластоидной клеточной линии с помощью МКА 7С11 получена специфическая полоса, соответствующая молекулярной массе 42 кДа, что согласуется е соответствующей молекулярной массе антигена АРО-1 или Fas. Как anti-APO-1 МКА и anti-Fas, МКА 7CII реагируют с мышиными клетками, транс-фецированными кДНК, кодирующей человеческий Fas-антиген, и не реагируют с нетрансфецированными клетками. С помощью конкурентного ингибирования показано, что преинкубация YT-клеток с неконъюгированными 7С11 МКА полностью отменяет последующее окрашивание anti-APO-1. Преинкубация YT-клеток с anti-APO-1 МКА блокирует последующее окрашивание МКА 7С11. А окрашивание Fas-трансфецированных мышиных клеток биотинилированными 7С11 было блокировано так же хорошо как anti-Fas МКА или неконъюгированными 7С11. Таким образом, авторы показали, что МКА 7C1I, как и АРО-1 и anti-Fas распознают один и тот же или рядом расположенные эпитопы АРО-l/Fas-антигена. С помощью проточной цитометрии была определена экспрессия APO-l/Fas-антигена на нормальных и опухолевых

Методы иммуноанализа

Фильм "Земляне"

Документальный фильм, посвященный тематике жестокого обращения человека с животными. Фильм поделен на несколько частей, каждая из которых затрагивает проблемы в той или иной области, что в целом указывает на эгоизм и бессердечность человеческого рода, а также на пагубность животноводства и рыболовства в глобальных масштабах.
Scroll To Top
[ Reset Settings ]
Rambler's Top100
Картаsns krf e0 nd5 ah81 rod solnce rod solnc cent1 cen40
rss
Карта