Информационный сайт для врачей и студентов-медиков
 
Вс, Май 15, 2011
Text Size

Иммунология - Иммунологические проблемы апоптоза - Барышников А.Ю.

Гпава 4

Получение и характеристика моноклональных антител ICO-160 против CD95(Fas/APO-1)-антигена

За два десятилетия развития гибридомной технологии были разработаны четкие критерии характеристики моноклональных антител (МКА) против дифференцировочных антигенов лейкоцитов человека, которые включают пять последовательных этапов. Первый этап — сравнение гистограмм распределения клеток, окрашенных исследуемыми МКА и референтными МКА, полученными на проточном цитофлюориметре. Второй этап — двойное окрашивание, при котором одно антитело мечено FITC, а второе — фикоэритрином. При этом, если оба МКА реагируют с той же самой клеткой, то она окрашивается этими двумя красителями. Третий этап — конкурентная ингибиция. Клетки инкубируются с избытком холодных исследуемых МКА, а затем с мечеными референтными МКА. Если оба МКА выявляют тот же самый или близко расположенный эпитоп, то меченые референтные МКА с клеткой не связываются и свечение клеток отсутствует. Четвертый этап — модуляция антигена. Он применяется только в том случае, если антиген модулирует, т.е. исчезает с поверхности клетки после соединения с МКА. При этом клетки сначала инкубируются с исследуемыми МКА в течение 3-18 ч, а затем — с референтными МКА. Если реакция с референтными МКА отсутствует, то это свидетельствует о том, что оба МКА реагируют с той же самой молекулой. Пятый этап — определение молекулярной массы антигена. С развитием технологии клонирования генов и получения трансфектированных клеток работа по характеристике несколько упростилась. Если МКА реагируют с трансфектированными клетками, то это указывает на их специфичность. По этим критериям

Методы иммуноанализа

Фильм "Земляне"

Документальный фильм, посвященный тематике жестокого обращения человека с животными. Фильм поделен на несколько частей, каждая из которых затрагивает проблемы в той или иной области, что в целом указывает на эгоизм и бессердечность человеческого рода, а также на пагубность животноводства и рыболовства в глобальных масштабах.
Scroll To Top
[ Reset Settings ]
Rambler's Top100
Картаsns krf e0 nd5 ah81 rod solnce rod solnc cent1 cen40
rss
Карта