Информационный сайт для врачей и студентов-медиков
 
Вс, Май 15, 2011
Text Size

Иммунология - Иммунологические проблемы апоптоза - Барышников А.Ю.

В опытах по сравнению МКА ICO-160 и IPO-4 методом двойной метки у нас отсутствовали прямо конъюгированные с РЕ и FITC МКА ICO-160 и IPO-4. В связи с этим мы использовали 4-этапную реакцию. МКА ICO-160 биотинилировали сукцин-био-тином. На первом этапе реакции лимфоциты периферической крови больных множественной миеломой или здоровых доноров, экс-прессирующих повышенный уровень антигена CD95(Fas/APO-l), инкубировали с биотинилированными МКА ICO-160 (ICO-l60b). Инкубацию проводили при 4°С в течение 30 мин. После двукратной отмывки раствором PBS клетки инкубировали со стрептави-дин-фикоэритрином в тех же условиях. После двукратной отмывки PBS клетки инкубировали с МКА IPO-4 в течение 30 мин при 4°С. После однократной отмывки клетки инкубировали с изотип-специфической сывороткой против IgM, меченной FITC (МКА IPO-4 имеют IgM-изотип). После двукратной отмывки раствором PBS клетки анализировали на проточном цитофлюориметре.

Как видно из рис. 4.4, все окрашенные клетки локализованы в квадранте 2. Это свидетельствует о том, что оба М КА реагировали с одной и той же клеткой. Отсутствовали клетки, окрашенные только МКА ICO-160 (квадрант 1), а также клетки, окрашенные только МКА IPO-4 (квадрант 4). Не окрашенные обоими МКА клетки локализованы в квадранте 3.

Из вышеприведенного можно сделать заключение, что МКА ICO-160 и IPO-4 реагируют с одними и теми же клетками среди лимфоцитов периферической крови как больных множественной миеломой, так и здоровых доноров. Таким образом, можно подтвердить, что оба МКА реагируют с той же самой молекулой.

Селективная экспрессия эпитопов на лимфоцитах не обнаружена. Более того, при обработке клеток МКА ICO-160 не происходило блокирования реакции МКА IPO-4. Это свидетельствует о том, что МКА ICO-160 направлены, возможно, не к эпитопу «А» молекулы CD95. Для дальнейшего установления отношения эпитопа, выявляемого МКА ICO-160, к эпитопам «А» молекулы CD95 мы предприняли исследование с использованием МКА 7С11, полученными нами в рамках работы VI Международного совещания

Методы иммуноанализа

Фильм "Земляне"

Документальный фильм, посвященный тематике жестокого обращения человека с животными. Фильм поделен на несколько частей, каждая из которых затрагивает проблемы в той или иной области, что в целом указывает на эгоизм и бессердечность человеческого рода, а также на пагубность животноводства и рыболовства в глобальных масштабах.
Scroll To Top
[ Reset Settings ]
Rambler's Top100
Картаsns krf e0 nd5 ah81 rod solnce rod solnc cent1 cen40
rss
Карта