Информационный сайт для врачей и студентов-медиков
 
Вс, Май 15, 2011
Text Size

Иммунология - Иммунологические проблемы апоптоза - Барышников А.Ю.

Результаты опытов при использовании обоих МКА ICO-160F и UB.2PE в концентрациях по 20 мкл были неожиданными. Все окрашенные клетки располагались в квадранте 1, т.е. были окрашены только МКА UB2PE. Полностью отсутствовала реакция МКА ICO-160F, хотя в контроле, где к клеткам добавлялись только одни МКА ICO-160F, реакция была. Отсутствовали также клетки в квадранте 2 (одновременно 2 метки). Эта картина наблюдалась при постановке реакции на всех клеточных линиях — HL-60, Jurkat, Molt-4, Daudi. В контрольных образцах, окрашенных только МКА ICO-160F, реакция была нормальной, т.е. окрашенные клетки находились в квадранте 4. Результаты опытов могли быть легко объяснимы, если бы первыми вносились МКА UB2. Если оба МКА выявляют один и тот же эпитоп, то первые МКА блокируют связывание вторых. Результаты реакции объяснимы для клеток линии Raji, на которой прямо конъюгированные с F1TC МКА 1CO-160F не реагируют.

Было высказано предположение, что оба МКА распознают один и тот же эпитоп, но МКА UB2 обладают большей аффинностью и вытесняют связавшиеся первыми МКА ICO-160F. Были поставлены опыты по определению равновесного состояния, когда ненасыщающее количество МКА UB2 оставляет свободные сайты для связывания МКА 1CO-160F. С этой целью, после инкубации клеток с 20 мкл МКА JCO-160F и последующей двукратной отмывки к клеткам добавлялись различные количества МКА UB2PE (разведения 1/4, 1/10, 1/50, 1/100). Действительно, оказалось, что при разведении МКА UB2PE в 50 или 100 раз, клетки переместились в квадрант 2, т.е. были окрашены обоими МКА (рис.4.6). Однако, как подчеркивалось выше, клеточные линии различались по степени экспрессии антигена на своей поверхности и, следовательно, для каждого вида клеток необходимо было подбирать ненасыщающее количество МКА. В табл. 4.6 представлена зависимость процентов антиген-положительных клеток, окрашенных двумя МКА, от разведения МКА UB2. При увеличении разведения увеличивается процент клеток с двойной меткой.

Методы иммуноанализа

Фильм "Земляне"

Документальный фильм, посвященный тематике жестокого обращения человека с животными. Фильм поделен на несколько частей, каждая из которых затрагивает проблемы в той или иной области, что в целом указывает на эгоизм и бессердечность человеческого рода, а также на пагубность животноводства и рыболовства в глобальных масштабах.
Scroll To Top
[ Reset Settings ]
Rambler's Top100
Картаsns krf e0 nd5 ah81 rod solnce rod solnc cent1 cen40
rss
Карта