Информационный сайт для врачей и студентов-медиков
 
Вс, Май 15, 2011
Text Size

Иммунология - Иммунологические проблемы апоптоза - Барышников А.Ю.

Аналогичные данные были получены с клетками линии HL-60. Преинкубация клеток с 20 мкг немеченых МКА ICO-160 в течение 30 мин полностью блокировала связывание с клетками меченых МКА 1СО-160.

Напротив, преинкубация клеток линии Molt-4 или Daudi стой же самой концентрацией МКА в течение 30 мин, 2, 18 или 72 ч при комнатной температуре вызывала лишь частичную, но статистически значимую блокаду (рис. 4.9). Из рисунка видно, что после преинкубаиии с немечеными МКА ICO-160 интенсивность флюоресценции снижалась, но не достигала негативного уровня. Анализ по Колмогорову—Смирнову показал достоверность блокады. Еще слабее была блокада немечеными МКА ICO-160 на клетках линии ТНР1. Однако она также была статистически значима.

Увеличение дозы немеченых МКА ICO-160 с 20 до 100 мкг/мл приводило к полной блокаде связывания меченых МКА на клетках линии Daudi, но не на клетках линии ТНР1.

Таким образом, способность блокировать связывание меченых МКА ICO-160F немечеными МКА ICO-160 зависела от линии клеток и была оптимальной на клетках линии Jurkat и HL-60 в дозе 20 мкг. На клетках линии Molt-4 и Daudi полную блокаду МКА вызывали в дозе 100 мкг. Блокирующая способность не зависела от времени инкубации.

После обнаружения блокирующей дозы немеченых МКА ICO-I60 мы перешли к основному опыту — блокаде связывания МКА UB2 против антигена CD95(Fas/APO-l).

Сначала мы инкубировали клетки линии Jurkat с 20 мкл МКА UB2, конъюгированными с фикоэритрином в течение 30 мин при 4°С, затем, после двукратного отмывания PBS, к клеткам добавляли 20 мкл меченых FITC МКА ICO-160. (По сути, та же двойная метка, но анализ проводили по гистограмме зеленой флюоресценции.) Было обнаружено, что МКА UB2 в столь малой концентрации полностью блокируют эпитоп, и МКА ICO-160 с клетками не связывались. Это свидетельствует о том, что оба МКА распознают тот же самый или близко расположенный эпитоп.

Затем мы выполнили ту же самую реакцию, но на первом этапе добавили блокирующую дозу немеченых МКА 1СО-160, а затем

Методы иммуноанализа

Фильм "Земляне"

Документальный фильм, посвященный тематике жестокого обращения человека с животными. Фильм поделен на несколько частей, каждая из которых затрагивает проблемы в той или иной области, что в целом указывает на эгоизм и бессердечность человеческого рода, а также на пагубность животноводства и рыболовства в глобальных масштабах.
Scroll To Top
[ Reset Settings ]
Rambler's Top100
Картаsns krf e0 nd5 ah81 rod solnce rod solnc cent1 cen40
rss
Карта