Информационный сайт для врачей и студентов-медиков
 
Вс, Май 15, 2011
Text Size

Иммунология - Иммунологические проблемы апоптоза - Барышников А.Ю.

через CD95 и не зависят от уровней экспрессии эпитопов молекулы CD95(Fas/APO-l).

Более адекватной моделью для изучения С095-опосредован-ного апоптоза являются клетки линии Jurkat. Мы индуцировали апоптоз в клетках линии Jurkat с помощью вышеуказанных концентраций МКА ICO-160 и IPO-4 в течение 24 ч. В качестве положительного контроля использовали индукцию апоптоза доксорубицином. Было обнаружено, что доксорубицин вызывал образование ДНК-овой лестницы. Действие МКА было не столь однозначным. МКА IPO-4 вели к формированию четких дискретных низкомолекулярных фрагментов ДНК, а МКА 1СО-160 подобным действием не характеризовались. Исключить фрагмен-. тацию ДНК до размера в 300 или более кпа в данном методе, однако, не представляется возможным, так как при электрофорезе в 3 % агарозе крупные молекулы могут задерживаться в месте их внесения в гель. Более пригодной для изучения начальных этапов фрагментации ДНК явилась бы 0,8 % агароза, однако мы рассчитывали на изучение терминальных этапов расщепления ДНК, для которых 3 % агароза вполне пригодна. В целом, полученные данные подтверждают результаты метода TUNEL и свидетельствуют о том, что под действием ICO-160 в ходе апоптоза ДНК в клетках Jurkat не расщепляется на мелкие фрагменты.

Конечным проявлением апоптоза является фрагментация клетки или потеря ею части хроматина, что может быть зарегистрировано в виде появления фракции гиполиплоидных клеток. Это может быть зарегистрировано цитофлуориметрически при окраске фиксированных клеток пропидиумом йодидом.

С целью отработки оптимальных условий индукции апоптоза мы исследовали время определения апоптоза, чувствительность' разных клеточных линий к Fas-опосредованному апоптозу, зависимость от дозы и индукцию в жидкой и твердой фазе. Апоптоз регистрировали на проточном цитофлюориметре по окраске клеток пропидиумом йодидом. Использовали клеточные линии Jurkat, Daudi, KGIa, Molt-4, Raji, THP-1 и HL-60. Апоптоз определяли через 4, 18, 24, 48 и 72 ч после индукции МКА ICO-160. МКА исследовали в дозах 1 мкг/мл, 10 мкг/мл, 50 мкг/мл и 100 мкг/мл. Для

Методы иммуноанализа

Фильм "Земляне"

Документальный фильм, посвященный тематике жестокого обращения человека с животными. Фильм поделен на несколько частей, каждая из которых затрагивает проблемы в той или иной области, что в целом указывает на эгоизм и бессердечность человеческого рода, а также на пагубность животноводства и рыболовства в глобальных масштабах.
Scroll To Top
[ Reset Settings ]
Rambler's Top100
Картаsns krf e0 nd5 ah81 rod solnce rod solnc cent1 cen40
rss
Карта